USP 공전에 준거한 Shodex HPLC 분석 애플리케이션 사이언스21 입니다.

USP 공전에 준거한 Shodex HPLC 분석 애플리케이션

2021년도 KOREA LAB 전시회 참가기업의 세미나 자료입니다.

Showa Denko K.K.의 'USP 공전에 준거한 Shodex HPLC 분석 애플리케이션'을 이용한 세미나자료는 한국쇼코츠쇼(주)에서 제공하였으며 주요 내용은 다음과 같다.

Shodex 컬럼을 이용하여 보다 안정적인 의약품 분석

최근 의약품 분석에는 높은 분석 안정성을 가지는 컬럼이 필수불가결하며, 많은 사용으로 검증이 완료된 컬럼의 중요성이 높아지고 있다. Shodex 컬럼은 Gel을 직접 제조하는 메이커로 보다 안정적이고 재현성이 확보된 분석이 가능한 특장점이 있다. 이에 미국약전 USP의 기준에 준거하여 Shodex 컬럼을 이용한 의약품 분석 애플리케이션을 개발하였다.

USP 공전에 따른 Exenatide(엑세나타이드) 분석

39개의 아미노산으로 구성된 펩타이드인 Exenatide는 GLP-1 유사체의 제2형 당뇨약으로 널리 사용되고 있다. 미국 약전(USP42-

NF37)에 따라 Exenatide injection Assessment의 분석은 L20 Gel을 충진한 컬럼으로 분석을 수행해야 하며 아래와 같은 요구사항을 충족해야 한다.

System suitability requirements:

- Resolution of exenatide and soybean trypsin inhibitor peaks: Rs ≥ 1.3

- Tailing factor range of exenatide: 0.8 1.4

- Relative standard deviation (RSD) ≤ 2.0%

이에 Shodex에서는 Protein KW-802.5 컬럼을 사용하여 분석을 수행하였고 시스템 적합성을 모두 충족함을 확인하였다.

Sample: System suitability solution, 20μL

1. Soybean trypsin inhibitor

2. Exenatide

Column: Shodex PROTEIN KW-802.5(8.0mm I.D. x 300mm)

Eluent: 0.13M Na₂SO₄ aq./CH₃CN/TFA=1500/500/2

Flow rate: 0.8mL/min

Detector: UV(214nm)

Column upload.: 25°C

USP 공전에 따른 Insulin Glargine(인슐린 글라진) 분석

Insulin Glargine은 인슐린과 인슐린 바이오시밀러의 유사체이다. 미국 약전(USP39-NF34)에 따르면 인슐린 글라진의 분석은 L20 Gel을 충진한 컬럼으로 분석을 수행해야 하며 아래와 같은 요구사항을 충족해야 한다.

System suitability requirements:

- Resolution**: ≥2

- Relative standard deviation(RSD): ≤2.0%

- Tailing factor of insulin glargine: ≤2.0

이에 Shodex에서는 Protein KW-802.5 컬럼을 사용하여 분석을 수행하였고 시스템 적합성을 모두 충족함을 확인하였다.

Sample: 100μL

System suitability solution(Prepared according to USP-NF method)

1. High molecular weight protein

2. Insulin glargine

Column: Shodex PROTEIN KW-802.5(8.0mm I.D. x 300mm) x 2

Eluent: CH₃COOH/CH₃CN/H₂O = 20/30/50

(pH to 3.0 Adjusted with 25% NH₃ aq.)

Flow rate: 0.5mL/min

Detector: UV(276nm)

Column upload.: Ambient

USP 공전에 따른 Azithromycin(아지트로마이신) 분석

Azithromycin은 15개 성분의 링 마크로라이드 계열의 항생제이다. 미국 약전(USP39-NF34)에 따르면 아지트로마이신의 분석은 L67 Gel을 충진한 컬럼으로 분석을 수행해야 하며 아래와 같은 요구사항을 충족해야 한다.

System suitability requirements:

- Resolution of azithromycin and azaerythromycin A: ≥3.0

- Relative standard deviation(RSD): ≤1.1%

- Tailing factor of azithromycin:0.8 to 1.5

이에 Shodex에서는 Asahipak ODP-50 4E 컬럼을 사용하여 분석을 수행하였고 시스템 적합성을 모두 충족함을 확인하였다.

Sample: 10μL

Azithromycin

Azaerythromycin A

Dissolved in 6.7g/L Dibasic potassium phosphate aq.

(pH 8.0 Adjusted with phosphoric acid)/CH₃CN=40/60

Column: Shodex Asahipak ODP-50 4E(4.6mm I.D. x 250mm)

Eluent : 6.7g/L Dibasic potassium phosphate aq.

(pH 11.0 Adjusted with 10 M KOH) / CH₃CN=40/60

Flow rate: 1.0mL/min

Detector: UV(210nm)

Column upload.: 40°C

USP 공전에 따른 Pamidronate Disdodium(파미드론산) 분석

Pamidronate Disodium, 파미드론산은 악성종양으로 인한 고칼슘 혈증, 유방암 골수성 골전증, 골생성부로안전증 치료에 사용되는 약물이다. 미국 약전(USP43-NF38)에 따르면 파미드론산은 L23 Gel이 충진된 컬럼을 사용하여 분석을 수행해야 하며 아래와 같은 요구사항을 충족해야 한다.

System suitability requirements:

- Tailing factor of disodium pamidronate: ≥0.3, ≤1.2

- Relative standard deviation(RSD): ≤2.%

이에 Shodex에서는 IC I-524A 컬럼을 사용하여 분석을 수행하였고 시스템 적합성을 모두 충족함을 확인하였다.

Reference(참고문헌) : Shodex Reference, Shodex Technical Note

'USP 공전에 준거한 Shodex HPLC 분석 애플리케이션'에 대한 궁금한 내용은 본 원고자료를 제공한 한국쇼코츠쇼(주)를 통하여 확인할 수 있다.

Model Name(모델명): Shodex Protein KW-802.5, Shodex Asahipak ODP-50 4E, Shodex IC I-524A

Country of Origin(원산지): Japan

Maker(제조사): Showa Denko K.K.

The Person in Charge(담당자): Shin Yonghun

Mail inquiry: yhshin@shokokorea.com

Data Services(자료제공): Shokokorea